Кръвен тест за вируса на Епщайн-Барр за антитела и PCR: как да се премине, норми

Под херпес сме свикнали да разбираме грозни, болезнени мехурести обриви по лицето в областта на устните, които впоследствие образуват кафяви корички. Уви, това е само едно от лицата на херпесния вирус, който може да се появи при хората в 8 форми. Това, което обикновено наричаме херпес, е вирус тип 1 или вирус на херпес симплекс. Вирусът тип 2 причинява генитален херпес, тип 3 - "варицела" и херпес зостер, тип 4 - инфекциозна мононуклеоза и няколко други доста опасни патологии и др. Този списък може да продължи, но ще се съсредоточим върху херпесния вирус тип 4, който иначе се нарича вирус на Епщайн-Бар. Нека се опитаме да разберем какво е херпесният вирус тип 4, защо е опасен, кога и защо се прави тест за вирус на Епщайн-Бар и какво показват резултатите от лабораторните изследвания.

Какво представлява херпесният вирус тип 4?

Херпесвирус тип 4, като една от разновидностите на херпесвирусната инфекция, е описан преди 53 години от английския вирусолог Майкъл Епщайн. В работата си по проекта професорът е подпомаган от своята докторантка Ивон Бар. Именно на тези хора вирусът дължи името си. 15 години след откриването на вируса обаче научното му наименование е променено на човешки херпесвирус 4, а преди година вирусът е наречен човешки гамавирус тип 4.

Но какво представлява вирусът Епщайн-Бар? Както всеки друг вирус, вирионът (вирусната частица) на херпесвирус тип 4 се състои от генетичен материал (в този случай, двуверижна ДНК) и обграждаща го протеинова обвивка (капсид). Освен това вирусът е обграден от мембрана, която му помага лесно да проникне в клетките на гостоприемника.

Всеки вирус е неклетъчна форма, която е инфекциозен фактор и не може да се развива и размножава извън клетките на живия организъм. Любимото местообитание на херпес вирус тип 4 се счита за епителните клетки на назофаринкса. Те също не презират левкоцитите, като дават предпочитание на една от техните разновидности, наречена В-лимфоцити. Именно В-клетките участват активно в осигуряването на имунната защита на организма. При контакт с антиген, който в нашия случай е херпес вирус тип 4 (или по-скоро неговите антигени), В-лимфоцитите произвеждат антитела (имуноглобулинови протеини). Те могат да бъдат открити в кръвта на пациента чрез провеждане на анализ за вируса на Епщайн-Бар (EBV).

Херпесният вирус тип 4 има 4 антигена, които се появяват в строго определена последователност:

• ЕА е ранен антиген, който се появява в началния стадий на заболяването, когато вирусните частици са в етап на синтез (първична остра инфекция или реактивиране на латентен вирус, когато имунитетът е намален),
• VCA е капсиден антиген, който се съдържа в протеиновата обвивка и също принадлежи към ранните, тъй като клинично заболяването може дори да не се прояви в този период,
• MA – мембранен антиген, появява се, когато вирионът вече е образуван,
• EBNA – ядрен (полипептиден или ядрен) антиген е един от късните антигени, антителата към които могат да бъдат открити дори няколко месеца след заболяването и остават в кръвта през целия живот.

Херпесният вирус тип 4 е много коварен. Тъй като вирусът е неактивен извън живия организъм, той може да се зарази само от човек, който е източник на инфекцията. И изобщо не е необходимо той или тя да проявява всички симптоми на заболяването; инфекцията може да бъде латентна, прикрита като обикновена умора. Например, синдромът на хроничната умора в повечето случаи е свързан с вируса на Епщайн-Бар.

Отделни вириони могат да бъдат открити в кръв, слюнка, сперма, вагинални секрети и тъкани на различни органи. Вирусните частици, заедно със слюнката и кръвта, могат да попаднат в предмети около нас, където ще останат неактивни, докато по някакъв начин не попаднат в човешкото тяло. В по-голямата част от случаите инфекцията се осъществява чрез въздушно-капковидни капчици или контакт (чрез целувка). Но са възможни и вътрематочно предаване на вируса от майка на плод, инфекция по време на кръвопреливане (ако кръвта на донора съдържа вирусни вириони) и сексуален контакт.

След навлизане в тялото и проникване в клетъчните структури, може да отнеме от 5 до 50 дни, преди заболяването да се прояви. Но то може и да не се прояви, протичайки в латентна форма, както е в повечето случаи.

Да, според изследвания, около 90% от възрастното население е имало херпесна инфекция, свързана с EBV, поне веднъж в живота си. Повечето хора дори не го знаят, защото тялото им е способно да се пребори с вирусната атака. Но това не винаги е така.

Как се проявява вирусът на Епщайн-Бар?

Най-често лекарите в практиката си се сблъскват със следните видове херпесвирусна инфекция тип 4:

• Хронична форма (възниква след острата фаза на заболяването, има някои общи симптоми на влошено здраве),
• Латентна или скрита форма (няма симптоми, но вирусът остава активен и се отделя в околната среда),
• Бавна форма (по-рядко срещана, симптомите се появяват един по един за дълъг период, завършвайки със смъртта на пациента).

Хората се заразяват за първи път с вируса на Епщайн-Бар, предимно в детска и юношеска възраст. Пикът на заболеваемостта е между 14 и 18-годишна възраст.

Първичната вирусна инфекция има 3 различни форми:

• асимптоматично (без клинични прояви),
• респираторни (симптоми на респираторна инфекция: треска, секреция от носа, обща слабост и др.),
• Инфекциозна мононуклеоза с триада от основни симптоми: висока температура, признаци на болки в гърлото с жълтеникави корички по сливиците, уголемяване на органи като черния дроб и далака; наблюдава се повишаване на нивото на левкоцитите и уголемяване на лимфните възли.

Има няколко варианта за излизане от острата фаза на заболяването:

• пълно възстановяване,
• симптомите на заболяването изчезват, но вирусът остава в тялото и се развива, въпреки че вече не води до забележими промени в клетките (състояние на носител),
• няма симптоми на заболяването, вирусът не напуска тялото, но също така показва малка активност (латентна форма),
• реактивиране на вируса от латентна форма,
• хроничен ход на инфекцията (с рецидиви на заболяването, хронична активна форма, генерализирана с увреждане на органи и системи на тялото).

Резултатът от продължителното пребиваване на вируса в тялото може да бъде:

• Хронична форма на инфекциозна мононуклеоза.
• Хематофагоцитен синдром: стабилна температура, намалени кръвни съставки (повишена коагулация), увеличен черен дроб и далак, кървене от лигавиците, жълтеница (поради чернодробна дисфункция), увеличени лимфни възли, неврологични симптоми.
• Латентна форма с развитие на вторичен имунодефицит: хипертермия за дълъг период от време, обща слабост, уголемяване и болезненост на лимфните възли, мускулни и ставни болки, чести инфекциозни заболявания.
• Развитие на автоимунни патологии под формата на лупус еритематозус, ревматоиден артрит и др.
• Прояви на синдром на хронична умора с влошаване на общото благосъстояние и работоспособност.
• Генерализирана форма на хронична инфекция с увреждане на централната нервна система, сърдечния миокард, бъбреците, черния дроб и белите дробове.
• Развитие на онкологични заболявания (лимфоцитна левкемия и лимфоми), при които се наблюдава патологично увеличение на броя на клетките на лимфната система. Херпесният вирус тип 4 не унищожава клетките-носители, а ги принуждава активно да се размножават, в резултат на което се откриват неоплазми от лимфоидна тъкан.

Както виждаме, вирусът на Епщайн-Бар не е толкова безобиден, колкото изглежда на пръв поглед, което означава, че не бива да се третира небрежно. Освен това, херпесният вирус тип 4 се характеризира с чести епизоди на вирусоносителство и латентна форма, да не говорим за различни форми на хронична инфекция, когато човек остава източник на инфекция, без дори да го подозира.

В този случай наличието на инфекциозен агент в организма може да се определи само с помощта на специален анализ за вируса на Епщайн-Бар, биоматериалът за който обикновено е кръв.

Показания за процедурата Тест за вируса на Епщайн-Барр.

Тъй като херпесвирусната инфекция тип 4 понякога не е толкова лесна за откриване, не винаги се подозира наличието ѝ. Но има определени признаци, по които лекарят може да подозира наличието на вируса в организма:

• силно отслабена имунна система (пациенти с ХИВ инфекция и СПИН, пациенти след трансплантация на органи или химиотерапия са изложени на риск),
• уголемяване на регионалните лимфни възли в брадичката и тилната област на главата и тяхната болезненост, особено ако това се наблюдава след кръвопреливане или трансплантация на органи от донор.
• остра респираторна вирусна инфекция (ARVI), протичаща на фона на много високи температури (38-40 градуса),
• появата на признаци на инфекциозна мононуклеоза, която най-често се проявява под влиянието на вируса на Епщайн-Бар.

Дори ако човек няма гореспоменатите симптоми, специалист може да се усъмни въз основа на някои резултати от рутинни изследвания (общ кръвен анализ и биохимия), както и изследвания на имунния статус.

Пълна кръвна картина за вируса на Епщайн-Бар може да покаже:

• увеличаване на броя на лимфоцитите,
• нисък хемоглобин, което показва намаляване на нивото на червените кръвни клетки,
• повишено съсирване на кръвта поради голям брой тромбоцити,
• появата на вироцити (атипични лимфоцити, подобни по структура на моноцитите).

Биохимичен кръвен тест, който предоставя информация за състоянието на вътрешните органи, ще покаже промени във функционирането на черния дроб и далака.

Имуноанализ за EBV може да покаже промяна в броя на специфичните лимфоцити, несъответствие в броя на имуноглобулините от различни класове (дисимуноглобулинемия) и дефицит на имуноглобулин G, което показва слаба имунна система и нейната неспособност да сдържи атаката на вируса.

Такива резултати от неспецифични анализи могат да предупредят лекарите, но все още е невъзможно да се каже точно с какво си имат работа. Всичко ще остане на етап предположения и предварителна диагноза. В повечето случаи лекарите подозират латентна форма на инфекциозна мононуклеоза, въпреки че други вирусни патологии (грип, хепатит и др.) могат да се проявят по същия начин.

Поради високата разпространеност на хепатит тип 4 и възможността за предаването му от майка на дете, тестът за вируса на Епщайн-Бар ще бъде полезен и при планиране на бременност. Ако майката е прекарала инфекцията преди това, тялото ѝ е развило антитела към нея. Реинфекцията обикновено се изключва поради формирането на силен имунитет и ако се случи, тя вече няма да има последствията, които са възможни при първата среща с вируса. Имунитетът ще ограничи активността на вируса през целия живот, въпреки че самият вирус ще остане вътре в тялото, както всеки от херпесните вируси.

Ако бъдещата майка се зарази с херпесен вирус по време на бременност, това може да доведе до спонтанен аборт и преждевременно раждане или вирусът ще повлияе негативно на вътрематочното развитие на бебето.

Онколог може да назначи EBV тест, ако има съмнение за лимфом на Бъркет или за диагностициране на туморни процеси при хора с ХИВ. Терапевт може да използва този тест за диагностициране на херпесни инфекции (диференциална диагностика за определяне на вида на вируса). Понякога тестът се използва и за оценка на ефективността на лечението.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ]

Подготовка

В зависимост от вида на изследването, биоматериалът за него може да бъде кръв, слюнка, урина, храчки, проба от околоплодна течност, остъргване, взето от цервикалния канал или уретрата, цереброспинална течност (ликвор). Най-често лекарите прибягват до кръвни изследвания, които се считат за най-информативни.

Ясно е, че някои фактори могат да повлияят негативно на качеството и количеството на биоматериала, така че си струва да се спазват определени правила предния ден:

• Всякакви изследвания (особено кръвни изследвания) се препоръчва да се правят сутрин на гладно. Последното хранене трябва да е не по-късно от 12 часа преди вземането на кръв, така че е по-добре да се пие вода за вечеря.
• Най-приемливият материал за анализ на вируса на Епщайн-Бар се счита за венозна кръв и преди да се дари кръв от вена, винаги се препоръчва 15-минутна почивка, ако човек току-що е пристигнал в лабораторията,
• За да се гарантира, че вземането на кръвни проби протича без последствия и резултатите от теста са надеждни, не се препоръчва да се извършва активна физическа работа или спорт, да се пие алкохол или да се пушат в рамките на 12 часа преди процедурата.
• Резултатите от тестовете могат да бъдат повлияни и от лекарствата, които приемате. Трябва да спрете приема на лекарства поне 2 дни преди теста. Ако това не е възможно, трябва да информирате лабораторната сестра за лекарствата, които приемате.
• По време на бременност, преди изследване за EBV, се прави тест за токсоплазмоза, за да се изключи фалшиво положителна реакция.
• Ако се прави кръвен тест за вируса на Епщайн-Бар на дете под 5-годишна възраст, половин час преди процедурата на детето трябва да се даде много преварена вода за пиене на сравнително малки порции.

Ако за анализ се вземе друг биоматериал, е необходимо предварително да се изясни с Вашия лекар всички нюанси на подготовката за анализа в зависимост от използвания материал.

[ 10 ], [ 11 ], [ 12 ]

Техника Тест за вируса на Епщайн-Барр.

Лекарите отдават важна роля в диагностицирането на херпес тип 4 и инфекциозна мононуклеоза на специфични тестове, които помагат за идентифициране на ДНК на вируса или уникални антитела в биоматериала на пациента. Основните видове лабораторни изследвания, използвани за откриване на вируса на Epstein-Barr в човешкото тяло, включват ензимно-свързан имуносорбентен анализ (ELISA) и PCR диагностика. Нека разгледаме по-подробно същността на двата метода и характеристиките на тяхното прилагане.

EBV ензимен имуноанализ

ELISA е изследване (анализ) на венозна кръв на пациенти за антитела срещу вируса на Epstein-Barr. В резултат на диагностиката, в кръвта на пациенти с EBV се откриват имуноглобулини от тип IgG или IgM (общо има 5 вида) към един от 3-те антигена на вируса (ранен, капсиден или ядрен).

Анализът се извършва в имунологична лаборатория, където се взема около 10 мл кръв от вената на пациента. След това биоматериалът се оставя на стайна температура за четвърт час, през което време кръвта се коагулира. Съсирекът се отделя внимателно от течната част. Течността се центрофугира и се получава чист кръвен серум. Именно той се подлага на допълнително изследване.

Идеята за метода е възникнала въз основа на данни, че тялото ни произвежда специфични антитела към всеки вид вируси и бактерии, които проникват в тялото отвън. Тялото ги разпознава като чужди и ги унищожава с помощта на уникални антитела, които здраво се прилепват към антигена.

Същността на ELISA анализа се основава на тази реакция. Антитела с прикрепени към тях маркери се свързват с антигени. Върху маркерите се нанася вещество, което променя цвета на пробата при реакция със специален ензим. Колкото повече такива „вериги“ има, толкова по-интензивен е цветът на биоматериала.

Ензимният имуноанализ може да се извърши по три метода:

• Директен ELISA. Тестовата течност се поставя в ямките и се оставя за около половин час, за да могат антигените да се прикрепят към стените на ямките. Към сорбираните антигени се добавя течност с маркирани антитела. След необходимото време (от половин час до 5 часа), когато антителата са се открили и свързали с антигените, течността се отцежда, ямките се измиват внимателно и към тях се добавя ензимът. Концентрацията на вируса в единица кръв се определя с помощта на метода на оцветяване.
• Косвен ELISA. При този метод, към антигените, сорбирани върху повърхността на ямките, се добавят изследваният кръвен серум и маркирани антитела. В резултат на това се получават 2 вида връзки, някои от които са маркирани. Резултатът зависи от концентрацията на антигени в изследваната проба. Колкото повече немаркирани антитела, толкова по-малко съединения са маркирани от ензима.

След това към измития състав се добавя специален реагент, който се използва за определяне на ензимната активност на комплексите антиген-антитяло.

• „Сандвич“. Различава се от индиректния метод по това, че първоначално върху повърхността се сорбират не антигени, а антитела. Към тях се добавя разтвор, съдържащ изследваните антигени. След измиване на носителя се добавят антитела с ензимни маркери. Излишните антитела се отстраняват отново и с помощта на водороден пероксид се получава оцветено вещество, което се изследва с помощта на спектрометричен метод.

Този вид анализ позволява не само да се идентифицират специфични антитела и да се определи концентрацията на антигени, но и да се изясни стадият на заболяването. Факт е, че различни антигени на вируса на Епщайн-Бар се появяват на различни етапи от херпесната инфекция, което означава, че антитела към тях се произвеждат в определен период от заболяването.

По този начин, IgG антителата към ранния антиген (IgG EA) се появяват в кръвта 1-2 седмици след инфекцията, когато заболяването е в острата фаза или етап на реактивиране на вируса. Имуноглобулините от този тип изчезват след 3-6 месеца. При хроничния ход на вирусната инфекция такива антитела са особено многобройни, а при атипичната форма те напълно липсват.

IgG антителата към капсидния антиген (IgG VCA) също се появяват рано, през първите 4 седмици от заболяването, но най-големият им брой се определя до втория месец на инфекцията. В острата фаза те се откриват при повечето пациенти, но може да не се появят при деца. При хроничния ход на заболяването, особено в периоди на реактивиране на вируса, количеството IgG VCA е особено високо. Тези антитела остават в човешката кръв завинаги, подобно на самия вирус, което показва формиран имунитет към инфекциозния агент.

IgM антителата срещу капсидния антиген (IgM VCA) могат да се появят още преди първите признаци на заболяването. Тяхната концентрация (титри) е особено висока през първите 6 седмици от заболяването. Този тип антитела са характерни за остра инфекция и реактивиране на хронична инфекция. IgM VCA изчезват след 1-6 месеца.

IgG антителата към ядрения ген (IgG EBNA) могат да показват, че човек преди това е бил директно заразен с херпесна инфекция. В острата фаза на заболяването те се откриват изключително рядко, обикновено се появяват по време на периода на възстановяване (в 3-тия-10-тия месец). Те могат да бъдат открити в кръвта няколко години след инфекцията.

Откриването на отделни антигени не предоставя пълна картина на заболяването, така че тестовете за различни антитела трябва да се извършват едновременно. Например, ако е наличен само IgM VCA и не е открит IgG EBNA, това е първична инфекция.

За съжаление, ензимният имуноанализ често е недостатъчен за откриване на първична херпесна инфекция или вродена патология. В последния случай антителата може изобщо да не бъдат открити. Като потвърдителен тест за първично заболяване се използва молекулярно изследване на кръв или друг биологичен материал за вируса на Епщайн-Бар.

PRC анализ за вируса на Епщайн-Бар

Този анализ се провежда на етапа на остра първична инфекция, в противен случай резултатът му ще бъде неправилен.

Същността на метода PCR (полимерна верижна реакция) е, че всеки инфекциозен агент има свой собствен набор от гени, съдържащи се в ДНК молекула. ДНК на патогена се съдържа в биоматериала, взет за изследване, в малки количества (самите вируси са с микроскопични размери), така че е много трудно да се оцени ситуацията. Но ако се проведе специфична реакция, количеството генетичен материал ще се увеличи значително, което ще позволи да се определи името на патогена.

С помощта на инструменти за еднократна употреба се взема материал за молекулярно изследване, който се поставя в специално устройство за анализ. Устройството представлява термостат със специална програма - термоциклер или усилвател. Устройството изпълнява пълен PRC цикъл няколко десетки пъти (около 2-3 минути), който има 3 етапа:

• Денатурация (при температура от 95 градуса, ДНК веригите се разделят).
• Отгряване (при температура от 75 градуса, в изследвания материал се въвеждат специално подготвени „праймери“ за EBV, които се прикрепят към ДНК-то на вируса).
• Разширяване или размножаване на генетичен материал (към семето се добавя специален ензим при температура от 72 градуса, който пресъздава нова ДНК верига, като по този начин удвоява количеството генетичен материал).

Ако пълният цикъл на полидименсионалната реакция се проведе 50 пъти, количеството материал ще се увеличи 100 пъти. Това означава, че ще бъде много по-лесно да се идентифицира патогенът.

Тест за вируса на Епщайн-Бар при дете

Както вече знаем, вирусът на Епщайн-Бар може да причини развитието на много заболявания. След като попадне в човешкото тяло, той остава негов постоянен обитател и само добре координираната работа на имунната система не му позволява активно да паразитира вътре в клетките.

Почти 95% от възрастното население на света живее с EBV вътре, като повечето от тях са се запознали с вируса в ранна детска възраст. Някои са го наследили от майка си, докато други са се заразили с вируса от родители и роднини, които са се втурнали към детето с целувки, или по въздушно-капков път в детската градина или училище (там инфекциозните заболявания обикновено придобиват „универсални“ размери).

Малките деца обикновено са склонни да слагат всичко в устата си, а най-голям брой вириони се намират в слюнката. И ако няколко деца облизват една и съща играчка в детската градина, докато учителите са заети със собствените си дела, тогава не е изненадващо, че вирусът се разпространява толкова активно в големи групи деца.

EBV може спокойно да се нарече болест на децата и младите хора, защото до юношеска възраст половината от децата вече имат вируса в тялото си (а до 30-годишна възраст около 90% от възрастните). Децата в различна възраст се разболяват по свой собствен начин. До една година, докато детето не общува активно с хората, вероятността да се разболее е малка. Дете над една година, дори и да не е ходило на детска градина, става по-общително, играе с връстници на улицата, ходи на активни пазарувания с майка си и т.н. и вероятността да се зарази с вируса става много по-висока.

Но това не е причина да затваряте детето в 4 стени. На възраст 1-3 години заболяването в огромното мнозинство от случаите протича без никакви симптоми, освен може би с леко повишаване на температурата и лека хрема, напомняща на настинка. Оказва се, че колкото по-рано детето се запознае с вируса, толкова по-лесно протича такова запознаване.

Не е добре, ако детето се разболее без поява на IgG VCA антитела в кръвта, което може да показва, че не е формиран имунитет към вируса, а реактивирането на вируса е възможно веднага щом имунната система отслабне. Причината най-вероятно е несъвършенството на имунната система на малките деца, която е в процес на формиране в продължение на няколко години.

Училищният живот предоставя още повече предпоставки за заболяването, особено в юношеска възраст, когато младите хора активно практикуват целуване. Но при деца над 3 години заболяването е по-рядко асимптоматично. В повечето случаи лекарите се сблъскват с инфекциозна мононуклеоза с характерните ѝ симптоми.

Въпреки факта, че патологията може да има дълъг курс (около 2 месеца), тя не е толкова опасна и не изисква употребата на сериозни лекарства. Лекарите предписват противовъзпалителни и антивирусни лекарства, ако се присъедини бактериална инфекция, те търсят помощ от антибиотици. Между другото, пеницилините не се препоръчват в този случай, поради факта, че могат да провокират появата на кожен обрив.

Не мислете, че ако дете или тийнейджър се разболее от инфекциозна мононуклеоза, това означава, че вирусът на Епщайн-Бар се е настанил в тялото им. Заболяването има и други по-рядко срещани патогени, като цитомегаловирус (херпесен вирус тип 5). За да разберат с какво си имат работа, лекарите предписват тест за вируса на Епщайн-Бар и, ако е необходимо, други лабораторни изследвания.

Вярно е също, че инфекциозната мононуклеоза не е единствената проява на EBV в детска възраст. Има и други заболявания, свързани с този патоген, но в нашия регион те са рядко срещани.

Така, лимфомът на Бъркит (на който EBV дължи откриването си) се среща главно при деца в африканските страни, много рядко в Америка и още по-рядко в Европа (и то само на фона на СПИН). Тумор на челюстта с увреждане на лимфните възли, бъбреците и други органи се открива при деца на възраст 3-8 години.

Назофарингеален рак, значителна част от други лимфоми, окосмена левкоплакия на устата - всичко това са прояви на EBV на фона на силно намален имунитет, който се наблюдава при HIV инфекция и по-късния ѝ стадий СПИН.

Вродената имунна недостатъчност и добавянето на вируса на Епщайн-Бар са опасна смес, която може да доведе до развитие на пролиферативен синдром при дете. В този случай увеличаването на броя на В-лимфоцитите води до появата на гранули в много органи, което им пречи да функционират нормално. Това е заболяване с висока смъртност, но не се развива на фона на нормален имунитет.

Може да се каже, че в детска възраст вирусът на Епщайн-Бар е опасен главно в случаи на имунодефицит поради развитието на различни усложнения. В повечето случаи всичко се ограничава до инфекциозна мононуклеоза. И въпреки че не изисква специално лечение, лекарите все пак предпочитат да установят естеството на патогена, за което на детето се предписва общ кръвен тест, ензимен имуноанализ и PCR.

Тъй като в детството се наблюдава предимно първична инфекция, е напълно възможно да се ограничите само до пълна кръвна картина и PCR, което е доста информативно при първоначално откриване на заболяването.

[ 13 ], [ 14 ], [ 15 ], [ 16 ], [ 17 ], [ 18 ], [ 19 ], [ 20 ], [ 21 ], [ 22 ]

Нормална работа

Резултатите от PCR анализа се обработват чрез електрофореза или с помощта на маркирани „праймери“. В последния случай е достатъчно просто да се добави реагент (хромоген) и по цвят да се определи дали в пробата има вириони. Положителен резултат от електрофорезата се посочва, когато в изследваната проба се открият ДНК нишки с различна дължина.

По време на инкубационния период на заболяването и асимптоматичното вирусоносителство, PCR ще даде отрицателен резултат, както и в случай на абсолютна липса на вируса в организма. В началото на развитието на първичната инфекция и в ранните ѝ стадии, PCR в реално време може да даде както положителни, така и отрицателни резултати, което по никакъв начин не изяснява ситуацията.

Въпреки това, в разгара на заболяването (остра фаза), при хроничното му протичане или реактивиране на вируса (обостряне) и в случай на атипични форми, анализът ще бъде положителен. Ако човек е болен от дълго време и вирусът в тялото му е в неактивно състояние, PCR анализът ще даде отрицателен резултат, т.е. провеждането на този анализ през този период също е неподходящо, както и при твърде ранни стадии на заболяването.

Трябва да се каже, че точни резултати от този вид лабораторни изследвания са възможни само в случай на първична инфекция и липса на вириони на други вируси.

Сега, относно ензимния имуноанализ за вируса на Епщайн-Бар. Той има същите изисквания. Наличието на херпесен вирус тип 5 или 6, токсоплазмоза и HIV инфекция в организма може да изкриви резултата не по-малко от небрежно отношение към анализа или лошо качество на използваните реактиви. В този случай може да се наложат допълнителни изследвания, като се вземат предвид възможните патогени.

Нормални резултати от тестове, които показват липса на вирус в организма, се считат за отрицателен резултат и за 4-те теста: IgG EA, IgM VCA, IgG VCA и IgG EBNA. Да, всеки тест се провежда отделно, тъй като антигените се появяват в различни периоди на заболяването. Понякога могат да се предпишат само отделни тестове, но в повечето случаи трябва да се направят и 4-те теста, но в различни периоди на заболяването.

Например, по време на инкубационния период на заболяването, както и при липса на инфекция, в кръвта не се открива нито един от 4-те вида антитела. Такъв резултат не може да се счита за достатъчен, защото не позволява да се разграничи човек, заболял за първи път, от здрав човек.

В началото на развитието на първичното заболяване в кръвта се появяват само IgM VCA антитела. В ранните стадии на заболяването към тях се присъединяват IgG VCA.

Острият стадий на първичната инфекция протича с образуването на три вида антитела: IgG VCA, IgM VCA и IgG EA, като най-голям брой IgG антитела се откриват към капсидния антиген. Същият състав на антителата се запазва в продължение на шест месеца след острата фаза на заболяването, но количеството на IgM VCA постепенно намалява до нула.

Шест месеца след заболяването, в кръвта се появяват IgG EBNA антитела, докато IgG EA имуноглобулините стават все по-малко, а IgM VCA напълно липсват.

При хронични случаи на заболяването или реактивиране на вируса може да има различни показатели. Най-често в кръвта се откриват и 4-те вида антитела. Но е напълно възможно имуноглобулините IgM VCA и IgG EBNA да не бъдат открити.

Усложнението на вирусната инфекция от туморни процеси възниква при липса на IgM VCA антитела, а IgG EBNA имуноглобулините не се откриват във всички случаи.

Но ензимният имуноанализ определя не само наличието на определени антитела, но и тяхната концентрация, което ни позволява да преценим стадия на патологията и възможните ѝ последици с по-голяма точност. Тук няма нужда да говорим за конкретни цифри. В крайна сметка всяка лаборатория провежда анализа по един от възможните начини, използвайки различни реактиви, така че резултатите от анализа на различните лаборатории могат да се различават в цифров формат.

На пациента се изисква да му бъде предоставен формуляр, указващ праговите (референтни) стойности. Ако резултатът е под прага, той се счита за нормален (отрицателен) показател. Ако определеното число е над референтната стойност, всичко показва положителен резултат, което означава, че вирусът живее в организма. Стойността на определената стойност показва стадия на заболяването и колонизацията на организма с EBV вириони, т.е. тежестта на патологията.

Ако ELISA тестът е отрицателен, това означава само, че човекът не е имал контакт с EBV в миналото. Но е невъзможно да се каже със сигурност дали вирусът в момента присъства в организма. Отрицателен резултат може да бъде причинен от инкубация на патогена в организма и асимптоматично вирусоносителство. Понякога, за да се гарантира, че организмът не е обитаван от вируса, е необходимо да се проведе втора серия от тестове след известно време.

Ако резултатът от ELISA теста за вируса на Epstein-Barr само леко надвишава референтните стойности, резултатът се счита за съмнителен. Причината най-често е ранният стадий на заболяването или наличието на вириони на друг вирус в организма. В този случай, след 2 седмици, се препоръчва да се направи повторен тест за EBV и евентуално за други патогени.

[ 23 ], [ 24 ], [ 25 ], [ 26 ], [ 27 ], [ 28 ], [ 29 ], [ 30 ]

Що се отнася до въпроса колко време отнема да се направи тест за вируса на Епщайн-Бар и кога можете да очаквате резултатите, няма особени трудности. В сериозна, добре оборудвана лаборатория ще трябва да чакате не повече от 2 дни след подаване на биоматериала. В ситуации, изискващи спешен анализ, отговорът може да бъде получен дори след няколко часа.

Тестът за вируса на Епщайн-Бар трябва да се проведе в надеждна лаборатория, където има както висококачествени реактиви, така и квалифицирани специалисти. В крайна сметка тестът струва пари (и не малка сума, тестът за един вид антитела струва около 150-170 UAH) и не бих искал да получа фалшив резултат, а след това евентуално да се свържа отново, но в друга лаборатория, за повторен тест.

[ 31 ], [ 32 ], [ 33 ], [ 34 ], [ 35 ]